生物化学实验（第二版）_王元秀,朱长俊_9787568082334

　　生物化学实验以不同生物分子为单元，全面、系统地介绍了与相应生物分子有关的生物化学实验技术与方法。全书共分为五章，涵盖蛋白质、核酸、酶与维生素、糖类、脂类等物质的分离、纯化、定性或定量分析、功能和代谢的研究等。每章又按实验内容的复杂程度分为三类，基础性实验、综合性实验和设计性实验。相比第一版，本书以二维码形式增加了设备使用、实验操作、实验结果分析等数字资源，使学生能更积极、准确地完成实验，提高学生的科学思维能力。本书可供高等院校生命科学类专业本、专科学生使用，也可供非生命科学类专业的学生使用，还可供相关专业的科研人员参考。

生命科学被公认为21世纪的带头学科之一。生命科学的发展离不开生物化学，生物化学既是生命科学的基础，又是生命科学的前沿，它是生物、农、医、药等与生命科学相关专业的必修课程，不仅学习生命科学及与其相关学科的学生需要学习生物化学，而且学习化学、物理学、环境科学、信息科学、材料科学等的学生也需要对生物化学有所了解。生物化学是一门实验性科学，实验教学占有重要的位置，学生动手能力的培养、创新能力、科学思维能力的培养主要依靠实验教学来完成。本书第一版于2014年8月出版，至今已近8年。这期间不仅生物化学学科及其技术方法上有许多新进展，而且教学模式、教学方法也发生了很大变化，国家双万计划的实施也极大地推动了丰富多彩的线上资源的推广应用，因此，本教材必须适应新形势，并使学生尽快地与迅猛发展的学科前沿接轨。为此，我们对第一版进行了修订。第二版在总体指导思想上仍遵循第一版的原则，本书以不同生物分子为单元，全面、系统地介绍与相应生物分子有关的生物化学实验技术与方法，全书共分为五章，涵盖蛋白质、核酸、酶与维生素、糖类、脂类等物质的分离、纯化、定性或定量分析、功能和代谢的研究等，每章又按实验内容的复杂程度分为三类，基础性实验介绍其基本原理和技术，综合性实验介绍生物分子连续分离制备研究技术，设计性实验以培养学生科研技能为主。第二版在编写形式上进一步突出以学生为本的指导思想，在内容和形式上进行了部分变动。 1. 调整部分实验内容：血清中谷丙转氨酶活力的测定改为肝脏谷丙转氨酶活力测定，蛋白质的酶解及多肽的分离纯化改为蛋白质的酶解及凝胶层析法测定多肽分子量，酵母细胞壁多糖的提取及凝胶层析法测定分子量改为酵母细胞壁多糖的制备，增加实验丙二醛（MDA）含量的测定。 2. 为了实验安全及提升人文关怀，实验项目前增加生物化学实验安全，实验步骤后增加废弃物处理。 3. 关于设计性实验，为了继续激发学生的实验创新能力，同时提高这些实验的开设率，设计性实验步骤处给予简单资料说明。 4. 为了提升本教材的直观性、启发性、开拓性及应用性，本教材以二维码形式加入设备使用、实验操作、实验结果分析等数字资源，使学生能更主动、正确地完成实验。本书可供高等院校的生命科学等专业本、专科学生使用，也可供非生命科学专业的学生使用，还可供其他专业的科研人员参考。感谢第一版作者对本书编写工作付出的努力。虽然编者对本书的修订和再版付出了很大努力，但限于编者水平，本版难免存在缺点和不足，恳请各位同仁和读者提出宝贵意见，您所提的宝贵意见与建议可以通过华中科技大学出版社转达或者直接发E-mail给编者：chm_wangyx@ujn.edu.cn。

生物化学实验安全/1

第一章蛋白质/3

第一节基础性实验/3

实验1纸层析法分离鉴定氨基酸/3

实验2微量凯氏(microKjeldahl)定氮法测定蛋白质含量/5

实验3Folin酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质含量/9

实验4考马斯亮蓝染色法(Bradford法)测定蛋白质含量/11

实验5BCA法测定蛋白质的含量/13

实验6紫外分光光度法测定蛋白质的含量/16

实验7蛋白质的性质(显色反应、等电点沉淀)/17

实验8乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白/25

第二节综合性实验/28

实验9膜分离技术分离纯化蛋白质/28

实验10聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白/33

实验11葡聚糖凝胶过滤层析法测定蛋白质相对分子质量/37

实验12SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量/41

实验13蛋白质印迹(WesternBlotting)/44

第三节设计性实验/50

实验14细胞色素C的提取制备与含量测定/50

实验15不同生物材料中氨基酸的提取及分离分析/53

第二章核酸/55

第一节基础性实验/55

实验16定磷法测定核酸的含量/55

实验17改良苔黑酚法测定RNA含量/57

实验18 紫外分光光度法测定核酸的含量/59

第二节综合性实验/61

实验19RNA的提取与组分鉴定/61

实验20离子交换柱层析分离核苷酸/63

第三节设计性实验/69

实验21动物肝脏DNA的提取、分离与检测(琼脂糖凝胶电泳)/69

第三章酶及维生素/72

第一节基础性实验/72

实验22酶的特异性与高效性/72

生物化学实验(第二版)目录实验23酶促反应动力学pH值、温度、激活剂、抑制剂对酶促反应速率的影响/74

实验24过氧化氢酶米氏常数(Km)的测定/77

实验25唾液淀粉酶活力的测定/79

实验26琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制/81

第二节综合性实验/83

实验27脲酶的活力测定/83

实验28肝脏谷丙转氨酶活力的测定/86

实验29碱性磷酸酶的分离纯化及比活力测定/90

实验30酵母醇脱氢酶的分离纯化及活力测定/93

实验31乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的琼脂糖凝胶电泳/97

实验32维生素C的定量测定2，6二氯酚靛酚滴定法/100

第三节设计性实验/102

实验33蛋白质的酶解及凝胶层析法测定多肽相对分子质量/102

第四章糖类/105

第一节基础性实验/105

实验343，5二硝基水杨酸比色法测定还原糖/105

实验35蒽酮法测定可溶性总糖/108

第二节综合性实验/111

实验36肌糖原的酵解作用/111

第三节设计性实验/114

实验37酵母细胞壁多糖的制备/114

第五章脂类/117

第一节基础性实验/117

实验38粗脂肪含量的测定(索氏抽提法)/117

实验39酸值的测定/119

实验40卵磷脂的制备和脂肪碘值的测定/121

实验41丙二醛(MDA)含量的测定/124

实验42薄膜层析法分离血清脂蛋白/126

第二节综合性实验/128

实验43脂肪酸的氧化/128

第三节设计性实验/130

实验44大豆品种的质量分析/130

附录常用缓冲液的配制/133

参考文献/138

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